BioRad Rotofor

BioRad_Rotofor_Cell.jpeg
Изображение с сайта www.bio-rad.com

       Система для проведения изоэлектрического фокусирования с последующей элюцией BioRad Rotofor Cell

Назначение. Изоэлектрофокусирование (т.е. фокусирование на изоэлектрической точке) позволяет разделить белковую/пептидную смесь на группы компонентов с общим pI. Препаративный вариант ИЭФ позволяет собрать эти группы компонентов и использовать для дальнейшего анализа. При выборе подходящего диапазона рН возможно разделение двух модификаций одного и того же белка (например, фосфорилированной/нефосфорилированной форм). Напротив, крупные белки с выраженными гидрофобными доменами не разделяются посредством IEF - они создают "шум", т.к. обладая ограниченной подвижностью, не формируют четкой зоны. Таким образом могут быть разделены значительные количества белка - до нескольких грамм (проба при этом "загрязняется" амфолитами).

Размещение: василеостровская площадка

Статус: эксплуатация в режиме тестирования

Календарь занятости прибора

Основные технические характеристики

  Препаративная фокусирующая камера объемом 60 мл - 1 шт. Препаративная фокусирующая камера объемом 18 мл - 2 шт.
Материал фокусирующих камер – акрил. Керамическая система охлаждения.
Платиновые электроды - диаметром 0,25 мм. Максимальное напряжение в ячейке - 3000 В.
Максимальная мощность - 15 Вт. Возможность подключения охлаждающей циркуляционной системы с максимальной скоростью подачи охладителя 12 л/мин. Объем вводимого образца в диапазоне от 18 до 58 мл.
Вакуумное извлечение разделенных фракций. Максимальное распределение белков по 20 фракциям.
Объем фракции в диапазоне от 1,75 до 3 мл. Источник питания. Стабилизация по току.
Стабилизация по напряжению. ЖК-дисплей для отображения параметров.
Регулируемое выходное напряжение в диапазоне от 20 до 5000 В.
Регулируемая сила выходного тока в диапазоне от 0,01 до 500 мА. Выходная мощность 400 Вт.
Память - 9 программ. Таймер установки времени, до 99 ч 59 мин.
Возможность подключения внешнего температурного датчика.
 
Дополнительно: ссылка на сайт компании производителя http://www.bio-rad.com/prd/en/US/LSR/PDP/684c3b20-b5b6-4ada-a45a-820a9db12763/Rotofor_and_Mini_Rotofor_Cells
 

Принцип работы

      ИЭФ - разновидность зонального электрофореза, в котором белки разделяются в зависимости от величины pI в градиенте рН, образуя зоны. Проба наносится по всей длине ячейки, после приложения разницы потенциалов к полюсам ячейки белки двигаются в зависимости от имеющегося заряда в направлении одного из полюсов - до тех пор, пока не попадут в зону рН, равную по величине рI, где белок останавливается, т.к. становится нейтральным.
     В препаративном варианте ИЭФ для создания градиента рН используют растворимые амфолиты, при этом ячейка поделена проницаемыми для белков мембранами на несколько отсеков, из которых собираются пробы с помощью вакуумного насоса.

Методики

Методики

Требования к образцам

     Сбор фракций осуществляется из ячеек, разделенных мембранами, с помощью вакуумного насоса. Степень различий между фракциями определяется шириной выбранного диапазона рН (который, в свою очередь, разбросом pI компонентов смеси).

     Препаративному ИЭФ лучше подвергать не тотальные лизаты, которые слишком сложны по составу и могут содержать нефокусирующиеся компоненты (например, крупные гидрофобные белки), но их отдельные фракции.

Дополнительные аксессуары

Дополнительный аксессуары